Evaluation au microscope électronique à balayage de la capacité du "Remover" à éliminer un ciment à base de silicate tricalcique avec et sans activation ultrasonore

Description :

Préparation de l’échantillon 100 canines maxillaires extraites seront collectées au centre de soins de la faculté de médecine dentaire. Les dents qui présentent un apex ouvert, des résorptions, des caries, des obturations radiculaires, un diamètre apical initial supérieur à une lime K de taille 25 ou une courbure apicale supérieure à 10 degrés seront exclues. Des radiographies péri-apicales dans les plans mésio-distal et vestibulo-lingual et des scans par un système de tomographie volumique à faisceau conique (CBCT) permettront de sélectionner les dents ayant une configuration de Weine de type I avec un canal ovalaire : Les coupes axiales des dents seront évaluées à 3, 6 et 9 mm de l’apex. Lorsque le diamètre vestibulo-lingual sera égal ou supérieur à 2.5 fois le diamètre mésio-distal, les canaux seront considérés ovalaires et les dents sélectionnées. Répartition des dents en 2 groupes : Le CBCT préalablement réalisé sera également utilisé pour la standardisation anatomique comme suggéré par Paque et Peters (11). Les dents ayant des paramètres morphologiques similaires seront réparties en 2 groupes : - une longueur similaire Les dents seront raccourcies de façon à avoir approximativement la même longueur de travail (18 mm). - un diamètre apical similaire Le diamètre apical initial doit être inférieur à une lime K de taille 25 - un volume canalaire similaire Les données des CBCT seront analysées sur la version logicielle ITK-SNAP pour l’analyse volumétrique. Les points d’intérêt seront choisis en éliminant les zones de non intérêt. L’outil de calcul du volume du logiciel va permettre aussi l’ajout de zones voulues obtenant ainsi le volume canalaire (mm3). Ce protocole a déjà été décrit par Garg et Grewal (12). Les dents seront réparties en 2 groupes d’une façon aléatoire en utilisant un Web-based algorithm (www.random.org). Un seul opérateur effectuera toutes les procédures. Mise en forme et obturation des dents La cavité d’accès sera réalisée à l’aide d’une fraise boule diamantée de taille 12 (prima classic, Gloucester, Royaume-Uni). Les dents seront découronnées à l’aide d’un disque diamanté (Kerr Rotary) pour obtenir un repère plat pour l’instrumentation et une même longueur de travail (18 mm). Les canaux radiculaires seront préparés à l'aide d'instruments rotatifs 2Shape (Micro Mega, Besançon, France) selon la séquence 25 / 0.04 puis 25 / 0.06. Les canaux seront irrigués après le passage de chaque lime avec 3 ml de NaOCl à 2,5% en utilisant une seringue et une aiguille de calibre 30 (NaviTip, Ultradent, South Jordan, UT). Après l'instrumentation, la solution d’irrigation sera renouvelée et activée trois fois pendant 20 s à l’aide d’un appareil ultrasonique ENDO ONE  de 42000 Hz de fréquence et munit d’un insert en NiTi E 90 (Woodpecker, Guangdong, China). Les canaux seront ensuite remplis d'EDTA à 17% activé avec les ultrasons pendant 60 s. Les canaux seront ensuite rincés avec 3 mL de solution saline et séchés avec des pointes en papier absorbant (Dentsply Maillefer, Ballaigues, Suisse). Un ciment à base de silicate tricalcique Endosequence BC Sealer (Brassler, Savannah, GA) sera préparé et introduit dans le canal selon les recommandations du fabricant. Des cônes de gutta-percha enrobés ROEKO (Coltene/Whaledent, Altstatten, Switzerland), de taille FM, seront introduits dans le canal radiculaire jusqu'à la longueur déterminée, et le surplus de matériau coronaire sera éliminé avec un instrument chauffé et condensé a 1mm de l’entrée canalaire à l’aide d’un plugger numéro 2 de Machtou et une radiographie de contrôle et un CBCT seront effectués pour valider la qualité de l’obturation finale. Les cavités seront obturées avec un pansement temporaire (Meta Biomed, Chungcheongbuk-do, République de Corée) et les échantillons seront numérotés et conservés à 37 ° C et à 100% d'humidité pendant 30 jours, pour que le ciment achève sa prise. Désobturation canalaire La désobturation des dents sera effectuée sous microscope à grossissement x6 (Leica, Wetzlar, Allemagne). L’obturation provisoire sera éliminée à l’aide d’un insert ultrasonique numéro 2 monté sur un générateur D600 (Woodpecker, Guangdong, China). Groupe 1 : 25 canaux 25 canaux radiculaires seront instrumentés à l'aide du Remover (Micro Mega, Besançon, France). L'instrument sera introduit dans le canal à une vitesse de 700 rpm et un torque de 2.5Ncm selon les recommandations du fabriquant. Le moteur utilisé sera le E-connect (Eighteeth, province du Jiangsu, Chine). L'instrument sera ensuite déplacé vers l'apex à l'aide d'un mouvement d’avance-retrait avec une amplitude d'environ 3 mm. Une légère pression apicale sera appliquée avec un mouvement de brossage contre les parois latérales comme indiqué par le fabricant. Après trois mouvements, l'instrument sera retiré et nettoyé avec une compresse stérile et le canal sera irrigué avec 2,5% de NaOCl. Cette procédure sera répétée jusqu'à ce que l'instrument atteigne la longueur de travail. Une fois la longueur atteinte, 8 mouvements de limage pariétal seront effectués et intéresseront les 4 parois. Le canal sera k2irrigué avec 2,5% de NaOCl et asséché par le moyen d’une micro-canule d’aspiration (ROEKO Surgitip-endo, Coltene/Whaledent AG ). Le canal sera examiné sous microscope pour valider l’absence de matériau résiduel. Si des produits persistent un second passage de 8 mouvements de limage pariétal sera effectué jusqu’aucune trace de matériau ne soit visible au microscope. La perméabilité canalaire sera validée par le passage d’une lime K15. Le rinçage final se fera à l’aide d’une aiguille d’irrigation avec sortie latérale de calibre 30 (NaviTip, Ultradent, South Jordan, UT) placée à 2mm de la longueur de travail. Les canaux seront irrigués avec 17% d'EDTA pendant 3 min puis avec 5 ml de NaOCl à 2,5% pendant 60 s. Le Remover est un instrument à usage unique ; par conséquent, un seul canal radiculaire sera préparé avec chaque lime. Groupe 2 : 25 canaux Les autres dents (n=25) seront désobturées de la même façon décrite pour le groupe 1. Cependant, après la vérification de la perméabilité canalaire avec la lime K15, une étape supplémentaire est ajoutée. Elle consiste à effectuer une activation passive de l’irrigant et cela suivant la technique décrite par Lucas Van der sluis (13). Elle consiste à activer une solution de NaOCl à 2.5% avec les ultrasons pendant 20s. Cela se fera en plaçant la lime d’activation ultrasonique à 2 mm de la longueur de travail et en l’activant sans toutefois toucher les parois canalaires. Le renouvellement de l’irrigant et son activation seront répétés 3 fois pour une durée totale de 1 minute. Le générateur ultrasonique sans fil ENDO ONE de 42000 Hz de fréquence ainsi qu’un insert en NiTi E90 spécialement conçu pour l’activation (Woodpecker, Guangdong, China) seront utilisés. L’étape de rinçage final décrite pour le groupe 1 suivra cette étape d’activation spécifique du groupe 2. Analyse des données par CBCT 3 scans seront effectués : préopératoire, après l’obturation canalaires et après la désobturation. Les scans seront réalisés sur un appareil Newtom VGI 9500 3D (QR SRL, Verona, Italy) avec les paramètres techniques suivants : mA= 35.04, kVp=90, temps d’exposition=5.4 sec, taille du voxel = 120 mm. Pour les données CBCT, on analysera le volume du matériau résiduel et la surface occupée par ce matériau résiduel. En ce qui concerne le volume : 2 CBCT seront pris en considération : le CBCT réalisé après l’obturation canalaire et le CBCT réalisé après désobturation. Les données des CBCT seront analysées sur la version logicielle ITK-SNAP pour l’analyse volumétrique. Les points d’intérêt seront choisis en éliminant les zones de non intérêt. L’outil de calcul du volume du logiciel va permettre aussi l’ajout de zones voulues obtenant ainsi le volume canalaire (mm3). Ce protocole a déjà été décrit par Garg et Grewal (12). Le volume du matériau résiduel sera mesuré et comparé au volume canalaire obturé et ceci à 3 niveaux : apical, moyen et coronaire. En ce qui concerne la surface occupée par le matériau résiduel : Pour chaque niveau (apical, moyen et coronaire), les coupes axiales seront prises en considération. Les données CBCT seront exportées sous forme de fichiers DICOM et des mesures du matériau de remplissage restant à l'intérieur du canal seront effectuées à l'aide de 3D-DOCTOR software (Able Software Corp., Lexington, MA). 3D-DOCTOR (Able Software Corp., Lexington, MA), est un logiciel d'affichage volumétrique capable de réaliser une segmentation vectorielle. Ce programme va permettre de segmenter les matériaux d’obturation résiduels au niveau de coupes axiales consécutives. Ainsi, pour chaque niveau (apical, moyen et coronaire), les surfaces du matériau résiduel seront enregistrées et seront comparées aux surfaces canalaires totales. Ces résultats concernant la surface occupée par le matériau résiduel seront comparés avec les résultats obtenues avec le MEB. Analyse des données par MEB Pour l'analyse MEB, une rainure sera réalisée au niveau de chaque dent avec une fraise diamantée pour séparer la dent longitudinalement. Les deux moitiés de chaque racine seront déshydratées à 37 ° C pendant 7 jours et purifiées (Desk IV Denton Vacuum, Moorestown, NJ, USA). Des images des tiers coronaires, moyens et apicaux des deux moitiés de toutes les racines seront prises au MEB à 10–15 kV et à un grossissement standard x 1000. Les images seront enregistrées selon le format TIFF et seront analysées en utilisant Microsoft PowerPoint software (Microsoft Corporation, Redmond, WA). Des scores seront attribués aux images MEB selon le rapport de Pirani et coll. (2009) : 0- plus de 75% des tubuli sont visiblement exposés. 1- matériau d’obturation présent et <75% des tubuli sont visiblement exposés. 2- matériau d’obturation présent et <50% des tubuli sont visiblement exposés. 3- matériau d’obturation présent et aucun tubulus n’est visible.